目前主流的微生物限度儀（尤其是藥品、食品檢測領(lǐng)域）多采用 **“膜過濾法”** 原理，核心是通過 “截留微生物 - 培養(yǎng)基培養(yǎng) - 定量計數(shù)” 的三步流程，實現(xiàn)對樣品中微生物的精準檢測，具體流程如下：
樣品預處理與稀釋：根據(jù)樣品類型（如藥品液體劑、食品混懸液），按照國家標準（如中國藥典、GB 4789 系列）進行預處理 —— 固體樣品需研磨、溶解后制成均勻混懸液，高濃度樣品需用無菌生理鹽水梯度稀釋（如 10?1、10?2 稀釋），確保最終檢測的微生物數(shù)量在儀器計數(shù)范圍內(nèi)（通常 10-300 CFU / 膜，CFU 為菌落形成單位）。
微生物截留（過濾環(huán)節(jié)）：將稀釋后的樣品注入微生物限度儀的無菌過濾杯，啟動負壓或正壓過濾系統(tǒng) —— 樣品中的液體通過孔徑為 0.45μm 的微孔濾膜（該孔徑可截留幾乎所有細菌、霉菌孢子，僅允許溶劑、小分子雜質(zhì)通過），而微生物則被均勻截留并附著在濾膜表面。
培養(yǎng)基培養(yǎng)：將截留微生物的濾膜轉(zhuǎn)移至特定培養(yǎng)基（如營養(yǎng)瓊脂用于菌落總數(shù)計數(shù)、麥康凱瓊脂用于大腸菌群篩選）表面，放入恒溫培養(yǎng)箱（細菌 36℃±1℃培養(yǎng) 48 小時，霉菌 25℃±1℃培養(yǎng) 72 小時），讓微生物在適宜環(huán)境下繁殖形成可見菌落。
計數(shù)與結(jié)果判讀：培養(yǎng)完成后，通過儀器的光學計數(shù)系統(tǒng)（如 CCD 攝像頭拍攝 + 圖像分析軟件）自動識別菌落數(shù)量，或人工輔助計數(shù)（部分簡易型號），結(jié)合樣品稀釋倍數(shù)計算出原始樣品中的微生物限度（如 “每克食品中菌落總數(shù)≤1000 CFU”），判斷是否符合產(chǎn)品質(zhì)量標準。
微生物限度儀的應用高度聚焦于 “對微生物污染有嚴格限量要求” 的行業(yè)，其中藥品和食品是最核心的兩大場景，且不同場景的檢測目標、標準要求存在顯著差異：
藥品的微生物限度檢測直接關(guān)系到用藥安全，需嚴格遵循《中華人民共和國藥典》（ChP）、《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（GMP）的要求，微生物限度儀的核心應用包括：
非無菌藥品的微生物限度檢查：口服固體制劑（如片劑、膠囊）、外用制劑（如軟膏、滴眼液）需檢測 “菌落總數(shù)”“霉菌和酵母菌總數(shù)”，以及特定控制菌（如大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌）—— 例如，口服片劑的菌落總數(shù)需≤1000 CFU/g，且不得檢出大腸桿菌。
藥品原輔料的微生物控制：藥品生產(chǎn)所用的原輔料（如淀粉、蔗糖、藥用輔料）需通過微生物限度儀檢測，避免因原輔料污染導致最終藥品微生物超標，尤其對注射劑、眼用制劑的原輔料，要求近乎無菌（需檢測無菌性，而非限度）。
生產(chǎn)環(huán)境的微生物監(jiān)測：藥品生產(chǎn)車間的空氣、工作臺面、操作人員手部，需用微生物限度儀配套的采樣工具（如空氣采樣器、接觸碟）采集樣品，檢測微生物數(shù)量，確保生產(chǎn)環(huán)境符合 GMP 潔凈度要求（如 A 級潔凈區(qū)需無菌，B 級潔凈區(qū)菌落總數(shù)≤5 CFU / 皿）。
